五子衍宗丸对小鼠乳腺癌化疗敏感性及化疗相关性疲劳的干预作用-太极五子优生馆
欧阳明子 谭为 刘艳艳 肖雅 黄颖 程静茹 罗仁 赵晓山
摘 要
01
目 的
探讨五子衍宗丸对化疗后肿瘤生长及由化疗引起的疲劳的作用及机制。
02
方 法
建立荷 4T1乳腺癌小鼠模型，并将其随机分为 TC 组、PTX 组、WZYZ 组、WZYZ＋PTX 组艾瑞达双子 。 给药 21 d，处死小鼠后检测小鼠脏器指数及肌肉超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。
03
结 果
WZYZ 组、WZYZ＋PTX 组小鼠的力竭游泳时间显著延长升华网， 与 TC 组比较，WZYZ＋PTX 组、PTX 组的瘤重均显著减轻；WZYZ＋PTX 组的肿瘤体积显著变小。与 PTX 组比较，WZYZ＋PTX 组小鼠的胸腺指数显著升高，且 SOD 值明显升高，MDA 浓度明显降低。
04
结 论
五子衍宗丸具有提高紫杉醇化疗敏感性、减轻化疗相关性疲劳的作用。 其作用机制可能与调节免疫，抑制氧化应激损伤等作用有关。
关键词 乳腺肿瘤； 化疗； 疲劳； 五子衍宗丸； 免疫； 氧化应激
乳腺癌是全球最常见的肿瘤之一。 据 2008 年的统计数据，乳腺癌占所有恶性肿瘤的 23％，占肿瘤死亡率的 14％［1］。 因术后高复发率及高转移率，以紫杉醇（paclitaxel，PTX）［2］为主的化疗在乳腺癌的综合治疗中占有重要地位，但 PTX 化疗时或化疗后所导致的最常见的副作用之一———肿瘤化疗相关性疲劳［3］以及 PTX 的耐药性严重影响了患者的治疗及生活质量［4］，限制了其在临床中的应用。近年来有研究表明五子衍宗丸具有增强机体免疫力［5］的作用，其主要组成药物枸杞子［6］与五味子［7］均有抗肿瘤等作用。
本研究拟在乳腺癌小鼠模型上进行五子衍宗丸的抗肿瘤及抗疲劳实验，探讨其对 PTX 的化疗敏感性及化疗相关性疲劳的影响及机制。
1 材 料与 方 法
1.1
药品与试剂
RPMI-1640 培养液 （吉诺生物公司产品，批号 10111002）；
胎牛血清（Hyclon 公司产 品 ，批 号 nvj0313）；
0．25％胰 蛋 白 酶 （Solarbio 公司产品，批号 20101012）；
PTX 注射液（哈尔滨三联药 业 有 限 公 司，批 号 100302C03）；
戊 巴 比 妥 钠（北京化学试剂公司，
娄清批号：061206）。
1.2
细胞 4T1 乳腺癌细胞株购于中科院上海细胞所
1.3
实 验 动物
7 周龄 SPF 级 雌 性 BALB ／ c 小 鼠60 只，体重 16 ～ 20 g［由南方医科大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK（粤）2006-0015）］。 实验前小鼠适应性喂养 7 d， 室 温 22 ～26 ℃， 相 对 湿 度40％ ～ 60％老太太哭坟，明暗交替 12 h，自由饮水、采食。
1.4
方 法
1．4．1 细胞培养
4T1 细胞用含10％胎牛血清的RPMI-1640 培养液培养。 取对数生长期细胞 ，用0．25％胰酶消化，1 ∶ 3 传代。 置 37 ℃，5％ CO2 培养箱中培养。
1．4．2 荷瘤小鼠模型的建立与分组
取对数生长期的 4T1 乳腺癌细胞，经胰酶消化后，用 PBS 调整细胞浓度为 1 × 106 cells ／ mL，在小鼠右侧腹壁第 4对乳房脂肪垫区域的皮下接种肿瘤细 胞 0．1 mL，相当于 105 cells ／ 只小鼠。当瘤块长到 50 ～ 100 mm3（接种后第 7 天）的时候吴哲晗，按瘤体积随机分为 5 组，每 组 10 只。 分别为正常对照（NC）组、肿 瘤 对 照（TC）组、PTX 组、WZYZ 组、WZYZ＋PTX 组。1．4．3 给药剂量与方法 参考药物等效剂量公式和文献［8］，设定五子衍宗丸的给药剂量为 1．5 g ／ kg，灌胃，每天 1 次。 PTX 的给药剂量为 10 mg ／ kg，腹腔注射，每 2 天 1 次。 分组后开始给药，即每天 9：00给 药鱼群算法，给 药 体 积 为 20 mL ／ kg，连 续 21 d未来军医。 NC 组 和TC 组给予相应体积的生理盐水。
1．4．4 观测指标
取分好组的 50 只小鼠，测定小鼠疲劳程度。 具体方法：于给药前、给药后的第 10、20 天，用 7％体重的铅坠系于小鼠尾部，将小 鼠 放入 水 温（25±1）℃的 游 泳 箱（高 30 cm，直 径 25 cm）中进行力竭游泳测试， 并记录力竭游泳时间。 各组小鼠自接受治疗开始，每 3 天用游标卡尺测 量肿瘤最长径（L）及与其垂直的宽径（W），并计算肿瘤体积，肿瘤体积（mm3） ＝ 0．52 × L × W2。 在末次给 药 1 h 后，用 3％戊 巴 比 妥 钠 麻 醉 小 鼠，摘 眼 球采血。 剥离瘤块、脾脏、胸腺并称重，切取两侧后腿腓肠肌。 按对应的每只小鼠的体重计算脏器指数。脏器指数＝脏器重量（mg） ／ 体重（g）丧尸茅厕。 用硫代巴比妥酸法测定丙二醛 （MDA） 含量， 超氧化物歧化酶（SOD）测定采用黄嘌呤氧化酶法。所有操作均按照试剂盒说明书进行。
1.5
统计学方法
选用 SPSS 13．0 软件进行数据统计分析，结果均以 x ± s 表示，采用单因素方差分析进行统计分析，经方差齐性检验，方差不齐使用近似 F 检验（Welch 法），统计检验水准为 α ＝ 0．05江天佑 。
2 结 果
2.1
五子衍宗丸对荷瘤小鼠的抗疲劳作用
如表 1 所 示，干 预 第 10 天 时，与 NC 组 比 较，TC 组、PTX 组、WZYZ＋PTX 组小鼠的力竭游泳时间显著缩短 ；干 预 20 d 时，与 PTX 组 比 较，NC 组、WZYZ组、WZYZ＋PTX 组小鼠的力竭游泳时间显著延 长。
2.2
五子衍宗丸对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作
用 WZYZ＋PTX 组、PTX 组的瘤重较 TC 组均显著减轻（P ＜ 0．01）；WZYZ＋PTX 组瘤重较 PTX 组显著减轻（P ＜ 0．05）。 如图 1 所示，WZYZ＋PTX 组的肿瘤体积较 TC 组显著减小（P ＜ 0．05）。 WZYZ＋PTX组、WZYZ 组 和 PTX 组 3 组小鼠的抑瘤率分别为33．66％、7．16％和 20．65％。
2.3
脏器指数
如表 2 示。脾指数： 与 NC 组比较，TC 组、PTX 组、WZYZ 组和 WZYZ＋PTX 组的脾指数均显著升高。 胸腺指数：与 NC 组比较，TC 组、PTX 组、WZYZ 组 和 WZYZ＋PTX 组 的 胸 腺 指 数 显著下降。 与 TC 组比较，PTX 组的胸腺指数显著下降。 与 PTX 组比较，WZYZ 组、WZYZ＋PTX 组小鼠的胸腺指数显著升高。
2.4
荷瘤小鼠肌肉 MDA 含量和 SOD 活性
如图2所示，PTX 组 SOD 活性较 TC 组与NC组均明显降低，WZYZ ＋ PTX 组的 SOD 活性与 NC 组比较明显降低，但较 PTX 组明显升高修月琴。 与 TC 组及 NC 组比较，PTX 组 MDA 浓度明显升高，WZYZ ＋ PTX 组的 MDA 浓度与 NC 组比较明显升高，但较 PTX 组明显降低。
3 讨 论
PTX 是 临 床 重 要 的 一、二 线 化 疗 药 物［9－10］，因其耐药及副作用， 目前其对妇科乳腺癌的化疗有效率仅为 40％ ～ 80％［11］。 药理学研究表明，五子衍宗丸有调节免疫功能、抗衰老、抗氧化等作用［5］，其中枸杞子［6］、五味子还具有抗癌作用［7］。 本实验中WZYZ 和 PTX 联合用药组的 抗肿瘤作用显著提高，其肿瘤抑制率达到 33．66％，WZYZ 组未显示抗肿瘤作用。 说明 WZYZ 和 PTX 联合用药起到的抗肿瘤作用不是协同作用， 而是 WZYZ 增强了小鼠乳腺癌对 PTX 的敏感性。 实验结果还表明，荷瘤小鼠的脾指数较 NC 组小鼠显著升高；荷瘤小鼠的胸腺指数较 NC 组小鼠显著降低；WZYZ＋PTX 组小鼠的胸腺指数较 PTX 组显著升高。 胸腺和脾脏是重要的免疫器官， 上述结果表明 WZYZ 的这种增敏作用可能与其提高荷瘤小鼠化疗后下降的免疫力相关。
肿瘤化疗相关性疲劳是患者化疗时主要的不适症状之一，其发生机制尚不完全明确韩庚偷电脑，目前现代西医学缺乏效果明确的干预措施。 最近有关研究表明覃霓， 运用中医药手段对肿瘤化疗相关性疲劳进行干预有较好效果。 本实验结果表明，与 PTX 组比较，WZYZ＋PTX 组小鼠的力竭游泳时间显著延长。说明 WZYZ 在应用 PTX 化疗的基础上能显著缓解由 PTX 所引起的小鼠游泳能力的下降。 另外，我们还发现， 五子衍宗丸可明显升高应用 PTX 化疗的荷 瘤 小 鼠 肌 肉 SOD 活 性 并 降 低 其 MDA 浓 度 。
MDA 与 SOD 之间的平衡遭到破坏抗战二十年， 会 使 体 内 的MDA 不断聚积， 氧自由基的增加可能导致肌肉细胞的凋亡引起肌肉的功能失调出现疲劳［12］。柯桥万达广场 因此，我们推断化疗药物引起的氧化应激损伤可能是肿瘤患者出现疲劳的潜在机制之一。
综上所述， WZYZ 具有提高 PTX 化疗的敏感性并减轻化疗相关性疲劳的作用，其作用机制可能与其调节免疫，抑制氧化应激损伤等作用有关。 应进一步进行临床相关实验加以验证。
4 参 考 文 献
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本文内容转自《实用医学杂志 2013 年 第29卷 第 11 期》，内容仅供分享交流之用，如涉侵权，请留言告知，我们会及时处理。
